Для определения содержания в крови общего билирубина и его фракций применяют диазометоды, основанные на взаимодействии билирубина с диазотированной сульфаниловой кислотой с образованием окрашенных азосоединений билирубина. Связанный билирубин («прямой») дает быструю прямую реакцию азосочетания. Реакция несвязанного билирубина значительно медленнее. Ее ускоряют вещества-акселераторы: смесь кофеина с бензоатом натрия и ацетатом натрия, метанол, ацетамид, этиленгликоль и т. д.

Наиболее распространенным диазометодом определения билирубина является метод Йендрошика – Грофа (унифицированный).

Прямой и непрямой билирубин сыворотки повышен при остром и хроническом гепатите, закупорке желчевыводящих путей, при токсической реакции на многие лекарственные препараты, токсины, при гепатозах.

Непрямой билирубин сыворотки повышен при гемолитических анемиях, других гемолитических реакциях, при дефиците глюкуронилтрансферазы (например, при синдроме Жильбера).

Лабораторная диагностика нарушений электролитного и минерального баланса

Под электролитами понимают соли, кислоты, основания, которые в водном растворе в большей или меньшей степени диссоциируют на свободные подвижные ионы. Ионы делятся на катионы и анионы. Катионы – положительно заряженные частицы, которые в поле постоянного электрического тока движутся к катоду. Анионы – отрицательно заряженные частицы, которые в поле постоянного тока движутся к аноду.

Основные катионы организма: натрий (Na+), калий (К+), кальций (Са2+), магний (Mg2+). Анионы: хлор (Cl-), фосфаты (НРО42-, Н2РО4), сульфат (SO42-), гидрокарбонат (НСО3-).

Концентрацию электролитов в Международной системе единиц (СИ) выражают в ммоль/л.

Исследование электролитного обмена имеет большое практическое значение, так как при целом ряде заболеваний сердечно-сосудистой системы, почек, ЖКТ характер клинического течения и исход в значительной степени зависят от нарушений электролитного баланса.

Кальций

Кальций – основной минерал человеческого скелета и самый распространенный катион организма.

В плазме крови концентрация кальция относительно постоянна и составляет 2,25-2,5 ммоль/л. Кальций в плазме распределен в трех фракциях: 50–60 % ионизированного и 5-10 % связано с органическими и неорганическими кислотами, 35–50 % связано с белками, преимущественно с альбумином.

Биологически активной формой является только ионизированный кальций, концентрация которого составляет 1,05-1,3 ммоль/л.

Основными методами определения общего кальция являются:

1) титрование с ЭДТА в присутствии мурексида – метод Вилкинсона;

2) колориметрический метод с использованием метил-тимолового голубого;

3) колориметрический метод с использованием крезол-фталеина или арсеназа III;

4) флуориметрический метод с использованием кальцеина;

5) пламенная эмиссия;

6) атомно-абсорбционная спектрофотометрия.

Повышение концентрации кальция до 3,0 ммоль/л достоверно свидетельствует о гиперкальциемии. Острая тяжелая гиперкальциемия (3,8 ммоль/л и выше) опасна для жизни.

Причинами гипокальциемии (ниже 2,1 ммоль/л) являются снижения функции паращитовидных желез (хирургические вмешательства, кровоизлияния), дефицит витамина D, рахит, переливание большого количества цитратной крови.

Ионизированный кальций (Са2+) с точки зрения физиологии является более ценным показателем.

Основными методами определения Са2+ являются:

1) применение ион-селективных электродов;

2) ферментативные методы.

Учитывая зависимость Саобщ от концентрации альбумина, измерение Са2+ считается более важным диагностическим показателям у пациентов с белковыми нарушениями.

Железо

Железо является важным катионом организма. 75–80 % железа приходится на гемовое железо, 20–25 % – резервное количество; 5-10 % входит в состав миоглобина; 1 % содержится в составе цитохромов, катализирующих процессы тканевого дыхания в клетках и тканях.

Баланс железа в организме складывается из равновесия между поступлением, депонированием, мобилизацией из депо и выведением этого микроэлемента.

В плазме (сыворотке) крови референтная концентрация железа составляет 3,0-31,3 мкмоль/л.

Наиболее распространенным методом определения железа в сыворотке крови является метод с батофенантролином.

Больной, у которого берут кровь, не должен принимать препаратов железа по крайней мере 5 дней (!). В противном случае могут быть получены завышенные результаты.

Определяемое в сыворотке железо связано с особым белком бета-глобулиновой фракции – трансферрином. В норме этот белок насыщен железом только на 30 %. Максимальное количество железа, которое может присоединять трансферрин до своего насыщения, обозначается как общая железосвязывающая способность сыворотки крови (ОЖСС).

Железосвязывающая активность сыворотки составляет 44,7-74,3 мкмоль/л.

Содержание железа сыворотки значительно снижается при железодефицитных анемиях. Величина ОЖСС либо находится в пределах нормы, либо даже несколько выше нормы.

Содержание железа снижено при уремии, гнойных и септических заболеваниях, а также инфаркте миокарда. Высокое содержание железа сыворотки имеет место либо при недостаточном использовании железа, либо при его повышенном поступлении в организм (первичный гемохроматоз). ОЖСС несколько снижена. Высокое содержание железа в сыворотке отмечается при так называемых сидероахрестических анемиях, при талассемиях и при всех формах желтух.

Калий

Калий – внутриклеточный катион. Калий активно участвует в обмене.

Состояние баланса калия оценивают, определяя его концентрацию в плазме (сыворотке) крови, моче и эритроцитах.

Концентрация калия в плазме 3,7–4,7 ммоль/л, в моче 30–90 ммоль/л.

Снижение калия в клетках развивается при ацидозе, повышение – при алкалозе. Гиперкалиемия никогда не бывает изолированной, а сочетается с изменениями кислотно-щелочного состояния крови.

В отличие от калия, на внутриклеточный объем приходится менее 7 % натрия. При этом во внеклеточном пространстве содержание натрия составляет 50 % от общего количества в организме. Оценить сбалансированность обмена натрия позволяет определение его концентрации в плазме крови, моче и эритроцитах.

Концентрация натрия в плазме составляет 137–147 ммоль/л, в моче 150–220 ммоль/л, в эритроцитах 13,5-21,8 ммоль/л.

В клинической лабораторной диагностике для исследования электролитного обмена широко используется ионселективный метод.

Содержание калия снижается при:

1) неадекватном питании (голодании);

2) неадекватном всасывании или острой потере кишечной жидкости (рвота, понос, синдром мальабсорбции);

3) повышенной потере через почки;